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液晶生化培養(yǎng)箱測(cè)定土壤菌群的實(shí)驗(yàn)

更新時(shí)間:2019-04-15點(diǎn)擊次數(shù):1799

    接下來(lái)喆圖小編給大家講講用液晶生化培養(yǎng)箱進(jìn)行水中土壤菌群的測(cè)定
    本方法適用于工業(yè)冷卻水中土壤菌群的測(cè)定,也適用于原水、生活用水及其他水中土壤菌群的測(cè)定.基本方法是采用混合培養(yǎng)基,利用平皿計(jì)數(shù)技術(shù),在液晶生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72小時(shí),測(cè)定循環(huán)冷卻水中土壤菌群的總數(shù)。下面喆圖小編給大家介紹一下具體步驟。
測(cè)定步驟

水樣的采集

     用無(wú)菌采樣瓶采集被測(cè)樣品,在采樣過程中,要保護(hù)瓶口和瓶頸,防止這些部分受雜菌污染。瓶?jī)?nèi)要留下足夠的空間,以備測(cè)定之前搖晃。

     若采集的水中有余氯,應(yīng)于采樣前在無(wú)菌操作下于無(wú)菌采樣瓶中加人滅過菌的硫代硫酸鈉,加人量為每升水樣約0.1g。

     水樣采集后應(yīng)立即進(jìn)行測(cè)定,如果2h內(nèi)不能進(jìn)行測(cè)定,應(yīng)把水樣放在冰箱中,于4℃~10℃保存,保存時(shí)間不宜超過24h。經(jīng)冷凍保存后的水樣需測(cè)定時(shí),從冰箱中取出于30℃左右活化4h~5h,再進(jìn)行測(cè)定。

     無(wú)菌箱(室)滅菌,把實(shí)驗(yàn)所用的無(wú)菌稀釋水、無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌吸管等用品放人無(wú)菌箱(室)內(nèi),打開紫外線燈滅菌30min。

     水樣的稀釋和接種,關(guān)掉紫外線燈,打開熒光燈,將待測(cè)水樣放人無(wú)菌箱(室)中,立即用75%的乙醇溶液浸泡的醫(yī)用脫脂棉球擦手,點(diǎn)燃無(wú)菌箱(室)內(nèi)的酒精燈。

    以下對(duì)水樣的稀釋和接種條的操作應(yīng)在無(wú)菌室內(nèi)的火焰區(qū)進(jìn)行。

     選擇適宜的稀釋度,應(yīng)使MAX后一個(gè)稀釋度接種后培養(yǎng)皿中生長(zhǎng)的菌落數(shù)小于300個(gè),在空白稀釋水樣瓶上標(biāo)上稀釋度數(shù)。

     用10倍稀釋法稀釋水樣,即用5mL無(wú)菌吸管吸取5mL水樣注入到45mL空白稀釋水中充分搖勻,此時(shí)稀釋度為10-1.

     另取一支5mL無(wú)菌吸管吸取5mL10-1水樣移人到第二個(gè)稀釋水中,充分搖勻,此時(shí)稀釋度為10~2,依次類推,直至需要的稀釋度為止。

     將不同稀釋度的水樣分別接種到無(wú)菌培養(yǎng)皿中,每個(gè)稀釋度重復(fù)接種3~5個(gè)皿,每皿接種1mL,接種時(shí)左手掌托住培養(yǎng)皿,大拇指和食指輕輕將培養(yǎng)皿提起,吸管與培養(yǎng)皿底成45°角相接。移開吸管時(shí)吸管不宜再碰到培養(yǎng)皿。接種時(shí)間不宜超過4s。每接種一個(gè)稀釋度更換一支無(wú)菌吸管。另取一組培養(yǎng)皿不接水樣,作為空白。同時(shí)操作。

     將滅過菌的培養(yǎng)基冷卻至(45士1)℃,掀開培養(yǎng)皿蓋,將培養(yǎng)基灌入培養(yǎng)皿內(nèi),每皿應(yīng)灌15mL~20mL。灌皿時(shí)不要使培養(yǎng)基直接灌在水樣上,灌皿后要將融化的培養(yǎng)基和皿中水樣*混合, 小心勿使混合液濺到培養(yǎng)皿的邊緣, 測(cè)定一個(gè)水樣從接種到灌皿不得超過20min。

培養(yǎng)

     待培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基固化后,倒置平皿,在液晶生化培養(yǎng)箱中29℃培養(yǎng)72h。

     以上內(nèi)容由喆圖小編編輯發(fā)布,僅供參考,如需了解液晶生化培養(yǎng)箱詳情請(qǐng)聯(lián)系喆圖客服

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